Информация для специалиста »

Тест ЦОК информация для специалиста

« Вернуться на предыдущую страницу



Тест ЦОК информация для специалиста


Тест ЦОК

В научном сообществе хорошо известно и широко распространено мнение о том, что первичная опухоль состоит из стромы [фибробласта, моноцитов, лимфоцитов, сосудов и т.д.] и злокачественных клеток, которые являются неоднородными, поскольку  состоят из различных подгрупп и подклонов с отличающимися характеристиками и способностями.   

Только небольшое количество популяций разовьет метастатическую способность, которая позволит им внедриться в соседние ткани, перейти в систему кровообращения и осуществить эпителиально-мезенхимальный переход (ЭМП).  

Они известны под названием «циркулирующих опухолевых клеток [ЦОК]». Крупное скопление ЦОК фактически является раковыми стволовыми клетками [РСК]. Данные клетки имеют всю необходимую информацию и способность к микроколонизации и микрометастазам, которые впоследствии развиваются в сильные микрометастазы. По этой причине пробы крови являются наиболее подходящей формой для анализа, поскольку он исследует раковые клетки и предоставляет соответствующую информацию для расчета риска и вероятности образования сильных метастазов.

Экспрессия генов и биомаркерный профиль

Тестирование циркулирующих опухолевых клеток является диагностическим инструментом, позволяющим индивидуально скорректировать противоопухолевую терапию (1).

РНК ЦОК могут использоваться для обнаружения всех профилей геномной экспрессии в ходе микроматричного анализа. Затем можно получить все показатели отклонений экспрессии всех генов. 

На основании этих данных можно установить экспрессию генов, связанную с:

a. Чувствительностью к определенным лекарственным препаратам.

b. Развитием резистентного фенотипа.

c. Метастазами (инвазией, миграцией, неоангиогенезисом и т.д.).

d. Механизмом самовосстановления (сопротивлением излучению и т.д.).

e. Темпом прогрессирования.

f. Иммортализацией раковых клеток.

g. Использованием таргетной терапии (TKI, Moab и т.д.).

h. Метаболизмом пролекарства до его активного вещества.

Всю эту информацию необходимо впоследствии оценить, поскольку соотношение между экспрессией генов и экспрессией белка не всегда линейно. Таким образом, клетки подвергаются воздействию агентов для подтверждения информации, выявленной (эпигенетическим) профилем экспрессии генов.

Тестирование агентов

Тест включает воздействие каждого доступного агента противоопухолевой терапии на монокультуры ЦОК и анализ устойчивости или чувствительности клетки к лечению. Патолог может фиксировать чувствительность к лечению, рассчитав степень, с которой агент химиотерапии вызывает апоптоз культивируемых клеток (2). Патолог также может фиксировать резистентные механизмы, присутствующие в культуре ЦОК, рассчитав степень сохранения клетками активного цикла, несмотря на воздействие агента (2). Последние исследования, разъясняющие перспективу индивидуализированной противоопухолевой терапии с помощью тестирования ЦОК, также подтверждают важность тестирования резистентных механизмов в клетках, обладающих способностью инициировать образование опухоли (СИОО и ЦОК) (1, 2). Данные биомолекулярные маркеры СИОО и ЦОК могут отвечать за неэффективность первичной терапии и, таким образом, являются перспективной целью индивидуализированной противораковой терапии (1, 3, 2, 4).  

ЦОК в сравнении с тканевым анализом

Важным фактором, способствующим осуществлению индивидуализированной диагностики и анализа ЦОК, является простота сбора образцов и доступность клеток (1). Ранее врачам-клиницистам для проведения анализа раковых клеток приходилось получать образец ткани, который должен храниться в формалине и фиксироваться в парафине (5). Анализ раковых клеток, изолированных от периферического кровообращения, помогает преодолеть это препятствие, а также предоставляет постоянный источник ДНК, исключает ошибки выборки, является моментальным, менее дорогостоящим и гораздо менее инвазивным, нежели биопсия солидной опухоли, сделанная хирургическим путем (6, 7).    

Индивидуализированная терапия обусловлена возможностью оценки эффективности лечения, полноты операции и мониторинга изменяющейся молекулярной биологии гетерогенных субпопуляций раковых клеток (8). Гетерогенные мутации и экспрессия белка могут диагностироваться высокочувствительными методами анализа ЦОК, при этом ЦОК имеют первостепенное значение для корректировки противоопухолевой терапии (1, 6).

Тест

Является ин-витро тестом, использующим оптимизированную ПЦР с обратной транскрипцией (ПЦР с ОТ), микроматричный анализ ДНК и иммуногистохимию для определения чувствительности отдельных раковых клеток к химиотерапии, моноклональным антителам и биологическим модификаторам реакции. Он предоставляет обширный спектр вариантов лечения с объективными доказательствами эффективности для определенного пациента, на основании которого можно затем подобрать наиболее оптимальный план лечения.

Отчет включает следующую информацию:

1. Экспрессия генов и биомаркерный профиль

Отчет охватывает [60] опухолевых генов: [22] из которых относятся к факторам роста и стимулами пролиферации; [10] генов относятся к самовосстановлению и стимуляторам; [5] – для ангиогенеза; [6] – для регулирования клеточного цикла и иммортализации /апоптоза; [4] охватывают ангиогенез-метастазирование; [11] связаны с метаболизмом лекарственных веществ и объектами; и [2] – для маркеров.

В отчете представлены очень точные данные в % контроля.

Подробный список:

06-метил-ДНК-тран., 5-LOX, ALK, ANG 1, ANG 2, Bcl-2, Bcr-abl, CD 117(c-kit), CD20, c-erb-B1, c-erb-B2, CES1&2 (карбоксилэстраза), c-MET, COX2, CypB1, DHFR, ДНК-деметилаза, DPD, E2F1, EGF, EML-4-ALK, EpCAM, эстрогенный рецептор, FGF, гамма-GC, GARFT, HAT, HDAC, гистон-деактилаза-дипептид, белки теплового шока (HSP 27, HSP 90 и HSP 72), h-TERT, IGF-r-2, IkB(a,b,c), KISS-1-r, MMP, mTOR, NFkB, Nm23, NP, NPM-ALK, NR3C4-A, NR3C4-B, p16, p180, p27, p53, PDGF, прогестеронный рецептор, Ras/Raf/MEK/Erk, рибонуклеотидредуктаза, SHMT, SS-r, TGF-b, TP, TS, UP, VEGF.

2. Медицинские препараты для химиотерапии

Тест охватывает [43] агентов для химиотерапии. К ним относятся [18] алкилирующие агенты, [1] эпотилон, [2] ингибиторы топоизомеразы 1, [8] ингибиторы топоизомеразы 2, [3] стабилизатор веретена клетки 1, [3] стабилизатор веретена клетки 2, и [8] нуклеозидные аналоги.

Результаты представлены в % и отображают эффективность каждого отдельного агента.

Отчет также охватывает [4] фактора резистентности (MDR1, MRP, LRP, GST), также представленных в % резистентности.

Подробный список:

5-ФУ, АКНУ, БИКНУ, бендамустин, блеомицин, капецитабин, карбоплатин, ЦЦНУ, цисплатин, циклофосфамид, дакарбазин, дактиномицин, даунорубицин, доцетаксел, доксорубицин, эпирубицин, эстрамустин, этопосид, флоксуридин, гемцитабин, идарубицин, ифосфамид, иринотекан, доксорубицин липосомальный, мелфалан, метотрексат, митомицин, митоксантрон, оксалиплатин, паклитаксел, пеметрексед, прокарбацин, ралитрексед, темозоломид, топотекан, треосульфан, трофосфамид, урацил-тегафур, винбластин, винкристин, винорелбин и т.д.

3. Вещества направленного действия

(список которых все время растет) включают моноклональные антитела и малые ингибирующие молекулы:

Анастрозол, бевицизумаб, бортезомиб, цетуксимаб, коксибс, иматиниба мезилат, лепролид, монтелеукаст, ингибиторы mTOR, ралоксифен, ритуксимаб, сорафениб и синитиниб, сурамин сульфат, тамоксифен, транстузумаб, а также талидомид (антиангиогенез и активация апоптоза).

Пути передачи сигналов проверяются на снижение мутаций.

4. Биологические модификаторы

Ингибиторы резистентных механизмов: 5-азацитадин, дисульфирам, кетоконазол и верапамил.

Тестирование ЦОК путем транскрипционного профилирования служит одним из методов тестирования. 

Само собой разумеется, что этот тип тестирования никогда не сможет со 100-процентной точностью спрогнозировать реакцию организма на лечение, и для этого существует ряд причин, к примеру, роль опухолевой микросреды в лекарственной устойчивости, фармакокинетика и фармакодинамика в реакции на химиотерапию, к тому же, посттрансляционные механизмы лекарственной устойчивости не измеряются напрямую микроматричным анализом ДНК. Тем не менее, клиническое признание этого типа «управляемого» лечения растет. Существуют также хорошие клинические результаты, полученные в клиниках разных стран мира, которые сейчас используют данный тест.    

Проверенные данные MGCC, собранные по нескольким клиникам через 2 месяца после проведения тестов, показали, что после лечения, назначенного по результатам теста, у более 70% пациентов наблюдалась ремиссия (или выздоровление). У всех этих пациентов была IV, то есть поздняя стадия заболевания. 

Список литературы:

1. Yu, S.R., et al., Circulating tumor cells and individualized chemotherapy. Chin J Cancer, 2009. 28(11): p. 1225-32.

2. Morrison, B.J., et al., Future use of mitocans against tumour-initiating cells? Mol Nutr Food Res, 2009. 53(1): p. 147-53.

3. Zhou, B.B., et al., Tumour-initiating cells: challenges and opportunities for anticancer drug discovery. Nat Rev Drug Discov, 2009. 8(10): p. 806-23.

4. Ross, J.S., Breast cancer biomarkers and HER2 testing after 10 years of anti-HER2 therapy. Drug News Perspect, 2009. 22(2): p. 93-106.

5. Georg, L., et al., Circulating Tumor Cells in Gastrointestinal Malignancies: Current Techniques and Clinical Implications. Journal of Oncology, 2009. 2010.

6. Panteleakou, Z., et al., Detection of circulating tumor cells in prostate cancer patients: methodological pitfalls and clinical relevance. Mol Med, 2009. 15(3-4): p. 101-14.

7. NCI. Executive Summary of the Tumour Stem Cell & Self-Renewal Genes Think Tank. 2009 [cited 12 December 2009]; Available from: http://dcb.nci.nih.gov/thinktank/Executive_Summary_of_the_Tumor_Stem_Cell.cfm

8. Maheswaran, S., et al., Detection of Mutations in EGFR in Circulating Lung-Cancer Cells. The New England Journal of Medicine, 2008. 359(4): p. 366.

9. Cristofanilli M, Budd GT, Ellis MJ, Stopeck A, Matera J, Miller M C, Reuben JM, Doyle GV, Allard WJ, Terstappen LW, Hayes DF: Circulating tumor cells, disease progression, and survival in metastatic breast cancer. N Engl J Med 2004;351:781–791

10. Hauch S, Zimmermann S, Lankiewicz S, Zieglschmid V, Bocher O, Albert WH: The clinical significance of circulating tumour cells in breast cancer and colorectal cancer patients. Anticancer Res 2007;27:1337–1341.

Будем рады ответить по всем интересующим Вас вопросам и предоставить дополнительную информацию.

С уважением,

компания “Nataly lab (1970) LP”

 
Регистрация врача